Описаниеак показывает практика, в последние годы в ветеринарной трансфузионной медицине значение определения групп крови у кошек и собак значительно выросло. В частности, спрос на определение группы крови находится на подъеме, так как только определив группу крови реципиента можно избежать смертельной ошибки при переливании крови. У кошек встречаются три группы крови, указанные как А, В и AB. Антигены кошек не имеют никакого отношения к антигенам человека АВО и определяются кошачьей алоиммунной сывороткой. Группы крови варьируются между породами. У кошек одна система групп крови, состоящая из двух антигенов, комбинировано или отдельно: А, В и AB. Группы крови у кошек рождаются аутономно по простым признакам с доминированием группы А над группой В. Большинство кошек имеют антиген А и почти одну треть из них, встречающихся в природе, имеют анти-В антитела. Группа У всех кошек, встречающихся в природе, есть высокий титр анти-А антител. Недавной опрос, проведенный в Соединенных Штатах, показал, что процент кошек с антигеном В варьируется от 0,3 до 59 в зависимости от породы.Кошки с группой крови АВ редкие, поскольку такие кошки на мембранах эритроцитов имеют оба антигена: А и В, они не являются имеют или имеют только анти-А, или только анти-В антитела. Определение групп крови у кошек играет важную роль в практичной ветеринарной медицине для предотвращения смешивания А и В эритроцитов. Кошки с B эритроцитами демонстрируют немедленную и катастрофическую системную анафилактическую реакцию (гипотензия, брадаликардия,ада, мочеиспускание, дефекация, рвота и тяжелая неврологическая депрессия), а также гемолитические признаки (гемолбинемия и гемоглобина) титра анти-А антитіла. Кошки с А эритроцитами и природными антителами с низким титром анти-B антител будут иметь слабую реакцию, при смешивании с B кровью, но даже это может повлиять на скорость восстановления организма в случае медицинского случая, поскольку эритроциты, что переливаются, имеют короткий срок. жизнь. Другие кошки с эритроцитами А, каким кровь группы B переливается впервые, реакцию не обнаруживают, но, как следствие, у них будет развиваться умеренный титр анти-B антител, который приведет к серьезной отрицательной реакции при дальнейшем несовместимом переливах. Определение группы крови у кошек также имеет важное значение при скрещении, что дает понимание возможных проблем у котят. Неонатальный гемолиз может произойти, когда существует несовместимость группы крови матери и плода. У пород часто встречается в природе кошек с группой В и высоким титром анти-А антител, неонатальный гемолиз может произойти в котят с группой крови А в результате скрещивания самки с группой крови В и самцом с группой А. Материнские анти-А антитела с молозивом поглощаются котенком и активно разрушают его эритроциты. И здоровые при рождении котята погибают в первые дни жизни. Определение групп крови у кошки и кота, а также отбор совместимости могут исключить гемолиз новорожденных котят.RapidVet-H (Feline) предназначен для определения кошек группы крови А, группы В и группы АВ. Антисыворотка лиофилизирована на тестовых карточках, хорошо разводится и сочетается с цельной кровью пациента. Все группы А этроцитов реагируют со специфической антисывороткой и вызывают реакцию аглютинации группа В эритроцитов проявляется со своей специфической антисывороткой все группы АВ эритроцитов вызывают аглютинацию во всех случаях. Характер аглютинации в тестовом поле А и в тестовом поле В значительно отличаются друг от друга из-за используемой разной природы антисыворотки.Принцип проведения анализаRapidVet-H (Feline) анализ основан на реакции аглютинации, которая происходит тогда, когда эритроциты, содержащие на поверхности мембраны одну из групп A, B или AB-антигенов взаимодействуют с высушенной антисывороткой специфического антигена, нанесенного на тестовое поле карты.Тип A эритроцитов поражает NeuGc2GD3, образующий гликолиподный антиген на поверхности мембраны. RapidVet-H (Feline) использует моющие монолональные антитела, доказывающие специфику этого антигена, лиофилизированного на тестовой карте. Молекула антитела дает ему способность к связыванию и склеиванию антигенов, специфических для крови группы А.Тип эритроцитов характерен для NeuAc2GD3 и имеет вид нейраминовой кислоты, представленной гранисиодами, который присутствует в группе А эритроцитов. Специфический вяжущий звеньев был обнаружен летин Triticum Vulgaris. RapidVet-H (Feline) использует лектин Triticum Vulgaris для обнаружения группы крови. Извлечение: рекомендуемое количество кошачьих пациентов демонстрирует автоаглютинацию разной степени, обусловленную различными факторами, вызывающими аглютинацию с собственными красными телами. Если пациент демонстрирует автоаглютинацию во время теста, определить группу крови невозможно без сепапарирования сыворотки и промывки эритроцитов перед тестом. Красные кровяные тельца промываются центрифугированием на скорости 2000 оборотов в течение 5 минут. После центрифугирования получают жидкую часть (плазму) в верхнюю и твердую (эритроциты) в нижний. Оператор должен собрать жидкую часть и заменить его таким же объемом физраствора. Затем оператор должен снова проверить образец, появится ли еще реакция автоаглютинации. Если это так, то он должен снова повторить процедуру промывания.Реагенты и материалы: Тесовая карта аглютинации. Каждая карта имеет 3 тестовых поля. Карта включает в себя Auto-Agglutination Saline Screen и два поля Patient Test — группа A и Patient Test группа В. Все карты упакованы индивидуально и упакованы в полиэтиленовые пакеты, содержащие влаговпитыватель. Хранить при комнатной температуре или в холодильнике (+2+8C).Бутилочка с разбавителем. Прозрачный пластиковый флакон содержит 0.02 молдм3 фосфатный буферный раствор (PBS) с pH 7,4. Наконечник пропускает по 50 мкл в одной капли. Хранить при комнатной температуре или в холодильнике (+2+8C).Пипетки и затяжки. Каждый полиэтиленовый пакет содержит пластиковые пипетки и затяжки. Хранение и стабильность:Тисовая карта аглютинации остается стабильной при комнатной температуре (+20+25C) в течение 18 месяцев с даты производства. Каждая карта имеет дату срока годности. Хранение в холодильнике (+2+8C) не продлевает существенно, но и негативное влияние на качество анализа не оказывает. Но может исключить непредвиденные или неведомые колебания комнатной температуры за пределы допустимого диапазона. Разбавитель стабилен в течение 24 месяцев с даты изготовления. Каждая бутылочка маркирована датой окончания срока годности.Если тест проводится правильно, хотя в одном тестовом поле с надписью Patient Test пройдет реакция аглютинации. Таким образом, тест прошел самоконтроль.Примечание: на каждом тестовом RapidVet-H (Feline) указана дата окончания срока годности, в котором учитывается раннее окончание срока годности компонента в наборе. Даже если некоторые компоненты имеют более поздние даты окончания индивидуального срока годности, их использование с компонентами других наборов не рекомендуется.Процедура проведения теста: Наберите минимум 0,4 мл крови пациента в шприц или пипетку сил ЭДТА в качестве антикоагулянтов. Анализ требует 150 мкл крови. Напишите на карте имениномер кошки и дату проведения теста. Положите тестовую карту на плоскую поверхность. Нанесите 1 каплю разбавителя (50 мкл) из бутылочки с дозатором в зону Auto-Agglutination Saline Screen. Наберите небольшое количество образца крови в пипетку и нанесите 1 каплю (50 мкл) в зону Auto-Agglutination Saline Screen. Используйте завалку для смешивания материалов по всей поверхности тестового поля в течение 10 секунд. Мешолку держите постоянно прижатой к поверхности тестовой карты (см. инструкцию с пользованием пипеткой). Имеет небольшой процент кошек, имеющих автоаглютинуцию. Если наблюдается аглютинация, прекратите проведение теста и прежде чем продолжить, сделайте процедуру промывания красных кровяных телец. Нанесите из бутылочки с дозатором в каждое тестовое поле 1 каплю разбавителя (50 мкг). Разбавитель помогает в реконструкции лиофилизированного материала.Аккуратно взболтайте пробирку с образцом крови пациента, чтобы вся внутренняя ее поверхность покрылась кровью для растворения антигенов на стенках.Означьте небольшое количество образца крови пациента в пипетку и нанесите по 1 капле (50 мкг) в каждый из 2 тестовых полей с надписью Patient Test. Используйте завалку для смешивания материалов с содержанием каждого поля в течение 10 секунд. Удерживайте завалку постоянно прижатой к поверхности тестового поля. Для каждого тестового поля используйте отдельную зарыжку. Добавьте вторую каплю разбавителя к тестовому полю Type A. Повторно не перемешайте. Укачивайте тестовую карту вдоль оси в течение 2 минут, убедитесь, что материал вращается каждый в своем поле. Будьте осторожны, не смешайте образцы между собой. Наклоните карту под углом 10-20, чтобы избыток в крови сбежал в нижнюю часть тестового поля. Оставляемый материал в верхней части тестового поля будет достаточно для оценки результата.Проверяйте результат, обратите внимание на поля, где состоялась аглютинация.Песля того, как материалы на карте высохли, наклейте на карту пленку для сохранности результата.Примечание использования пипетки: удерживайте пипетку между большим и указательным пальцами в закрытом плоском конце, сожмите и не отпускайте. Удерживайте вертикально пипетку и поместите открытый конец пипетки ниже поверхности образца. Разожмите пипетку для втягивания образца. Затем удерживайте пипетку в перпендикулярном положении непосредственно над тестовым полем, на который должен быть нанесен образец крови. Просто сожмите и нанесите каплю на тестовое поле (50 мкг). Для компенсации потери материала, остающегося на заражке, каждая пипетка имеет не более 50 мкг. Для каждого образца используйте новую пипетку. В любом случае пипетка не должна быть использована более одного раза, иначе может произойти смешивание материалов тестовых полей и результаты теста будут недостоверными.РессультатыЕсли анализ прошел правильно, должна быть видна аглютинация хотя бы одного из тестовых полей с пометкой Patient Test.Если аглютинация хорошо видна в тестовом поле для группы А, то фильтрованная кровь имеет группу А.Если аглютинация хорошо видна в тестовом поле для группы В, то фильтрованная кровь имеет группу В. Если аглютинация хорошо видна в Оба тестовых полях, то тестированная кровь имеет группу АВ.Слидует учитывать, что при любом тесте реакция аглютинации будет видна через 2 минуты.Характер аглютинации в тестовом поле B отличается от реакции в поле А.Аглютинация в тестовом поле А, обычно, содержит небольшое количество крупных шаров.Аглютинаций в тестовом поле, обычно, в виде небольших дискретных скоплений, каждый в виде головки шпильки.Если пациент анемический и если пациент имеет группу крови А, то антиген может стать насыщенным антителами и препятствовать перекрестной связыванию и аглютинации.Если пациент имеет низкий гематокрит (НСТ), это может помочь в проводке теста, проводя его без использования разведения в тестовых полях (A и B).Границы1. Для получения точных результатов важно четко следовать инструкциям.2. Всегда используйте новую пипетку для каждого образца и новую завалку для каждого тестового поля. Повторное использование любого устройства вызывает контаминацию и неточные результаты.3. Стабильность отдельных компонентов набора меняется. Держите компоненты, как указано на этикетках. Не используйте компонент с истечением срока годности. Использование простроченных материалов может привести к недостижимым результатам.4. Разбавитель представлен в бутылке с завинчивающейся крышкой, чтобы минимизировать непреднамеренное бактериальное или другое загрязнение. Разбавитель не должен использоваться ни для чего кроме проведения теста на определение группы крови.5. Физическая целостность образца пациента имеет решающее значение для корректности результата.6. Всегда набирайте полный шприц или пробирку, где используется ЭДТА. Меньшее количество крови вызовет слишком высокую концентрацию ЭДТА в тестовой пробе.
